تقنية تأشيب الDNA

تعتمد الكائنات الحية على الحمض النووي الريبي منقوص الأوكسجين DNA في نقل المادة الوراثية من جيل لآخر، وإن DNA على المستوى الكيميائي متشابه بين جميع الكائنات، إذًا يمكن قطع وربط شدف DNA معًا لتكوين DNA مؤشب، اعتمادًا على ما سبق نشأت تقنية تأشيب DNA والتي تعني دمج جزيئتين من DNA عائدتين لنوعين مختلفين ثم يتم إدخالها إلى خلية مضيفة بكتيرية غالبًا، وتهدف هذه التقنية إلى إنتاج مركبات جديدةٍ ذات أهميةٍ طبيةٍ أو علاجية أو صناعية، تعتمد هذه التقنية على عدة خطواتٍ يجب إتمامها بدقة للوصول إلى النتيجة المطلوبة.

يتم أولًا عزل المادة الجينية المرغوبة، حيث إنَّ الخطوة الأولى في rDNA تكمن في عزل المادة الجينية بشكلها النقي، يبدأ العزل باستخدام عدة أنزيمات حالة مثل الليزوزوم والكيتيناز من أجل اختراق الجدار الخلوي، والتخلص من الجزيئات والشوائب التي قد تلوث المادة الجينية ثم تتم إضافة الإيتانول الذي يرسب DNA بشكل خيوط ناعمة، ويتم لف هذه الخيوط المكونة من DNA النقي واستخلاصها.

تضاف لاحقًا أنزيمات القطع Restriction Enzymes، وتعمل هذه الأنزيمات كمقصات تقطع DNA في مناطق معينة حيث يتم إضافة أنزيمات القطع إلى DNA النقي وحضنها في ظروف ملائمة لعملها، يتم تحديد شدف DNA الناتجة واستخلاصها باستخدام الرحلان الكهربائي، اعتمادًا على حجمها وشحنتها.

يتم تضخيم الشدف الناتجة باستخدام تفاعل سلسلة البوليميراز PCR، حيث يتم الحصول على عدة نسخ من DNA الهدف باستخدام أنزيم DNA بوليمراز وذلك بدءًا من نسخة وحيدة من DNA الهدف.

تتمثل المرحلة التالية