تركيب عمود HPLC  والمحافظة عليه

تركيب العمود:

يستخدم لهذا الغرض قطعتان تدعيان nut و ferrul تعملان على ربط الأنابيب بالعمود بشكل جيد، كما أنه يجب الحرص لدى تركيبها التأكد من عملية التركيب بشكل جيد يضمن عدم وجود حجم ضائع بين العمود وبين nut وقد يؤدي إلى خطأ في التحليل، وهاتين القطعتين قد تكونان كما في الأعمدة إما من الفولاذ غير القابل للصدأ أو من peek.

المحافظة على العمود:

• يجب الحرص على عدم دخول أية مواد صلبة إلى العمود وبالأخص بلورات الأملاح المستخدمة في المحاليل الموقية المضافة للطور المتحرك أو المكونات الموجودة في العينة المحللة، والحرص على عدم دخول أية مواد ذات حجوم جزيئية ضخمة كالمواد البوليميرية ولضمان ذلك فإننا نقوم بتنفيذ مجموعة من عمليات الترشيح، منها ترشيح الطور المتحرك باستخدام مجموعة ترشيح مزودة بمرشحات ذات قطر 0.45 ميكرون، إضافة إلى ترشيح العينة المحللة باستخدام مرشحات ذات أقطار مماثلة عند تحضيرها كما أننا نستخدم filter on-line قبل إدخال الطور المتحرك إلى الجهاز، ويوجد ضمن الجهاز مجموعة من المرشحات ذات أبعاد لا تتجاوز الميكرون لضمان سلامة المضخة والعمود.
• يجب الانتباه إلى نوعية المواد والمحلات المستخدمة، إذ يجب أن تكون ذات نقاوة عالية لا تقل عن 99.9 % كما أن نوعية الشوائب فيها تكون مناسبة للعمود ونحرص على أن تكون المحلات المستخدمة HPLC grade وكذلك المحاليل المائية المستخدمة يجب أن تكون ذات نوعية خاصة محضرة من ماء نوع Type I تكون ناقليته 18/1 ميكرو سيمنز على الأكثر.
• عند الانتهاء من العمل يجب علينا ألا نترك المواد التي تم إدخالها للعمود ضمن العمود وخاصة في حال استخدمنا طور متحرك يحتوي على أملاح عائدة للمحاليل الموقية فعند الانتهاء من العمل ونريد أن نتابع نفس طبيعة العمل في اليوم التالي، فإنه يمكن أن نترك الطور المتحرك نفسه دون مشاكل، لكن عند تركه لمدة 3-1 أيام فإنه لابد من القيام بتنشيط العمود باستخدام محلول أسيتونتريل / ماء أو ميتانول / ماء بنسبة 1:1، أما عند تركه لمدة زمنية تتجاوز 7 أيام، فإنه يجب